绿芦笋中可溶态和结合态过氧化物酶的鉴定

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王璋 陆伯勋

美国加利福尼亚大学食品科学及工艺系 教授

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用0.05M磷酸钠缓冲液(pH7.0)和含有1.0M氯化钠的同一缓冲液将绿芦笋中可溶态和以离子态结合的过氧化物酶分别萃取出来。通过下述的连续步骤将这两种形态的过氧化物酶纯化:硫酸铵分级沉淀,SephacrylS-200柱色谱和ConA-Sepha-Fose 4B柱色谱。两种不同形式的过氧化物酶的纯化倍数分别为237和53倍。用等电聚焦法从可溶态过氧化物酶中检出11种具有不同等电点的同功酶;从结合态过氧化物酶中则检出8种同功酶。采用三类氢给予体和不同的缓冲液,测得两种不同形态的酶具有类似的最适pH范围4.2—5.0。两种不同形态的酶在pH4.5时的最适温度在50℃左右。两者在70℃和90℃时的热失活曲线呈双相形态。

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