谷氨酰胺转胺酶的分离纯化及酶学性质
Purification of Transglutaminase and Properties of Crude Enzyme
DOI:
中文关键词: 谷氨酰胺转胺酶,纯化,酶学性质
英文关键词: transglutaminase,purification,properties
基金项目:国家"十五"科技攻关项目(2001BA708B03 05).
鲁时瑛 周楠迪 堵国成 李华钟 陈坚
江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室,江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室,江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室,江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室,江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室 江苏无锡214036,江苏无锡214036,江苏无锡214036,江苏无锡214036,江苏无锡214036
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中文摘要:
茂原链轮丝菌Streptoverticilliummobaraense所产生的谷氨酰胺转胺酶发酵液通过抽滤、超滤、乙醇沉淀、离心和冷冻干燥,制得粗酶粉的酶活约为1033U/g.对粗酶研究发现,该酶的最适反应温度为52℃,最适pH为6.0;粗酶的pH稳定范围在4~8,温度稳定范围在20~40℃,离子强度对该酶的活性稍有影响.粗酶经CM 纤维素层析和SephadexG 75凝胶过滤层析后得到较纯的酶,通过SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳检验蛋白质纯度,得到较弱的单一区带.其中,CM 纤维素层析的纯化倍数为4.5,收率质量分数约为78.8%;凝胶过滤层析纯化倍数为1.11,收率质量分数为50%;用凝胶过滤法测得谷氨酰胺转胺酶的相对分子质量为40092.
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