高纯度诊断用乳酸脱氢酶的制备和酶促反应
Preparation and Enzyme Catalytic Reaction Conditions of Diagnostic Lactate Dehydrogenase with High Purity
DOI:
中文关键词: 乳酸脱氢酶 植物乳杆菌 纯化 酶促反应
英文关键词: Lactate Dehydrogenase Lactobacillus plantarum purification enzyme catalytic reaction
基金项目:国家“十五”攻关项目(2001BA501A16)资助课题.
石轩峰 杨海麟 王武
江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214036
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中文摘要:
设计并优化了植物乳杆茵发酵制备高纯度诊断用乳酸脱氢酶的技术路线.从培育的厌氧型植物乳杆茵中粗提乳酸脱氢酶制备液,经过DEAE Sepharose F.F.离子交换层析、Phenyl Sepharose6 F.F.疏水层析及Sephadex G-25 Fine凝胶过滤等方法进行分离纯化,比酶活达1096.8U/mg,纯度达88%,纯化倍数达到21.4倍,酶活力回收率为53.9%;高效液相色谱和SDS-PAGE电泳结果显示制得乳酸脱氢酶相对分子质量约为80000,含有两个亚基,每个亚基分子量约为39000.
英文摘要:
The preparation of diagnostic Lactate Dehydrogenase with high purity from a strain of Lactobacillus plantarum was designed. LDH was prepared by DEAE Sepharose F. F. ion exchange chromatography, Phenyl Sepharose 6 F. F. hydrophobic chromatography, and Seph
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