影响根癌农杆菌的电击转化条件

Studies on Electroporation Transformation of Agrobacterium tumefaciens

DOI：

中文关键词: 根癌农杆菌 电击转化法 PPT抗性

英文关键词: Agrobacterium tumefaciens,eletroporation,PPT resistance

基金项目:国家自然科学基金项目(30300027)资助课题.

匡小婴 饶志明 沈微 方惠英 诸葛健

江南大学工业生物技术教育部重点实验室 江苏无锡214036

(匡小婴，饶志明，沈微，方惠英)

，江南大学工业生物技术教育部重点实验室 江苏无锡214036(诸葛健)

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中文摘要:

采用电击转化方法将双元载体质粒pCAM3300导入根癌农杆菌LBA4404,研究了不同实验条件对转化率的影响.结果表明:当电场强度为11 kV/cm时,转化率最高,每微克DNA得到9.8×103CFU;在细胞OD600为1.0时进行电转化,转化率最高,每微克DNA得到9.54×103CFU;在一定的细胞浓度范围内,电击转化率与细菌浓度密切相关,转化率随着细菌浓度的上升而上升;质粒大小与电击转化率之间没有明确的关系.将含pCAMBIA3300的根癌农杆菌与粗糙脉胞菌共培养转化,在含有膦化麦黄桐(PPT)(405 mg/L)的平板上筛选到转化子.PCR扩增转化子的染色体,初步证明Bar基因整合进粗糙脉胞菌的染色体中.

英文摘要:

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