酵母蔗糖酶的提取方法

Study on Purification of Invertase from Yeast

DOI：

中文关键词: 酵母 蔗糖酶 提取 纯化

英文关键词: yeast invertase extraction purification

基金项目:

李楠 庄苏星 丁益

南京大学生命科学学院,医药生物技术国家重点实验室,江苏南京210093

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中文摘要:

采用甲苯自溶法、冻融法、SDS抽提法3种方法从酵母中提取蔗糖酶,经质量分数50%的乙醇分级沉淀、Mono Q阴离子交换柱层析纯化后,制得高纯度的酵母蔗糖酶。比较了上述3种提取方法并对该酶的部分性质进行了研究。纯化的酶经等电聚焦测定,等电点为5.6,SDS-PAGE鉴定其相对分子质量为60kD。以蔗糖为底物测得酵母蔗糖酶的表观米氏常数Km为0.013mol/L。结果显示3种提取方法各有优劣,冻融法和SDS抽提法的提取效率远高于传统的甲苯自溶法。其中SDS抽提法的效率最高,加之其操作简便,更适合于酵母蔗糖酶大规模的制备提取。

英文摘要:

This paper used three methods to extract invertase from yeast, which included in this manuscript, three different extraction method breaking cells by adding methylbenzene, frost grinding, and adding SDS for extracting invertase from yeast were investigate

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