露湿漆斑菌胆红素氧化酶的分离纯化及其性质
Purification and Characterization of Bilirubin Oxidase from Myrothecim roridum
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中文关键词: 露湿漆斑菌 胆红素氧化酶 纯化 性质 露湿漆斑菌 胆红素氧化酶 酶的分离纯化 性质 Bilirubin Oxidase Characterization Vmax 酶活 最适反应温度 相对分子质量为 组分 蛋白质 活性电泳 检测 PAGE Sephadex Fast Flow 硫酸铵沉淀 粗酶液
英文关键词:
基金项目:
刘友勋 马富英 熊征 颜克亮 吴航军 张晓昱
华中科技大学生命科学与技术学院,湖北武汉430074
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中文摘要:
露湿漆斑菌产生的胆红素氧化酶粗酶液通过硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow 和Sephadex G-100 纯化,得到纯化152.54 倍胆红素氧化酶,得率19.14%;用PAGE 检测为单一条带,活性电泳证实该单一蛋白质组分为胆红素氧化酶, SDS-PAGE 证明该酶的相对分子质量为64 000.该酶最适反应温度为55 ℃,以胆红素为底物时最适pH值为7.5,而以ABTS为底物时最适pH值为4,该酶在pH 3~8之间都能够检测到酶活.以胆红素为底物,胆红素氧化酶的Km值和Vmax分别为552.06 μmol/L和38.91 μmol/(L·min);而以ABTSA为底物,胆红素氧化酶的Km值和Vmax分别为631.84 μmol/L和12.79 μmol/(L·min).
英文摘要:
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