阿片肽酿酒酵母工程菌摇瓶发酵工艺
Expressing Foreign Opium Peptide by Fermentation of Recombinant Saccharomyces cerevisiae in Shake Flask
DOI:
中文关键词: 阿片肽 酿酒酵母 发酵
英文关键词: opium peptide,Saccharomyces cerevisiae,fermentation
基金项目:
陈义勇 施用晖 乐国伟
[1]常熟理工学院生物科学与工程系,江苏常熟215500 [2]江南大学食品学院,江苏无锡214036
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中文摘要:
研究了发酵培养基成分、补加方式及外源氨基酸对酿酒酵母发酵和表达的影响.结果表明,发酵前在液体发酵培养基中一次性补加酵母抽提物(YE)有利于目的产物的表达,发酵过程中补加YE不利于目的产物的表达,发酵中后期补加适量的葡萄糖有利于阿片肽的表达.添加外源氨基酸对酿酒酵母工程菌的生长有一定的促进作用,而且可以明显地影响阿片肽的表达.通过正交实验对酿酒酵母生长和表达条件进行优化,确定最优工艺参数为:培养基中酵母抽提物质量浓度为25g/L,C:N比2.8,培养基初始PH5.0,摇床转速220r/min.在最优条件下研究了酿酒酵母表达目的产物的情况,总蛋白质质量浓度为614.50mg/L.SDS-PAGE电泳和双波长凝胶扫描结果表明:目的阿片肽约占总分泌蛋白质的5%,其表达量为30.7mg/L,是优化前的1.49倍。
英文摘要:
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