黑曲霉原生质体的制备、再生及转化条件

Preparation, Regeneration and Transformation of Aspergillus niger Protoplasts

DOI：

中文关键词: 黑曲霉 原生质体 制备 再生 转化

英文关键词: Aspergillus niger,protoplast,preparation,regeneration,transformation

基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划);教育部跨世纪优秀人才培养计划

姚婷婷 王正祥

江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214036

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中文摘要:

为了建立原生质体介导的黑曲霉转化系统，研究了菌龄、酶系统、渗透压稳定剂、酶解时间对葡萄糖淀粉酶生产菌株黑曲霉CICIMF0410原生质体形成与再生的影响。结果表明，培养4d的幼嫩菌丝体最适于制备原生质体；综合考虑原生质体形成与再生的情况，作者选用1mol／L山梨醇为最适渗透压稳定剂，1g／dL蜗牛酶-1g／dL纤维素酶-0．1g／dL溶壁酶为最适裂解酶组合，30℃酶解2．5～3h，最适合的原生质体的再生培养基为含0．6mol／LMgSO4的TZ培养基。在PEG和CaCl2存在条件下，以潮霉素B为选择性标记，质粒pBC-Hygro转化原生质体，每微克DNA可获得4～5个转化予。

英文摘要:

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