枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶基因的克隆及高效表达
来源:     发布日期:2020/06/08 14:28:53  浏览次数:

枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶基因的克隆及高效表达

Cloning and Effective Expression of Glucose Dehydrogenase Gene from Bacillus subtilis in E. coli

DOI:

中文关键词: 葡萄糖脱氢酶 葡萄糖脱氢酶基因 高效表达 辅酶再生

英文关键词: glucose dehydrogenase gdh effective expression coenzyme regeneration

基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划);江苏省自然科学基金

徐娴 谢承佳 何冰芳

南京工业大学制药与生命科学学院,江苏南京210009

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中文摘要:

扩增了枯草芽孢杆菌中的葡萄糖脱氢酶基因(gdh),构建了诱导型表达载体pET-gdh,导入E.coliBL21(DE3)后获得了高效表达葡萄糖脱氢酶基因的重组菌BL21/pET-gdh。经过诱导时间、诱导温度参数的优化,IPTG诱导后重组菌BL21/pET-gdh的葡萄糖脱氢酶比酶活高达9.65 U/mg蛋白,SDS-PAGE电泳分析表明,重组蛋白质表达量占全菌胞内可溶性蛋白的53%,实现了葡萄糖脱氢酶基因的高效表达,为氧化还原酶催化系统提供高效率的NADP+与NADPH循环奠定了基础。

英文摘要:

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