ε-聚赖氨酸产生菌的筛选方法改进
来源:     发布日期:2020/06/08 10:37:37  浏览次数:

ε-聚赖氨酸产生菌的筛选方法改进

A Protocol for Screening of ε-Polylysine Producing Strains

DOI:

中文关键词: ε-聚赖氨酸 筛选 菌种鉴定 16srDNA

英文关键词: ε-polylysine screening strain identification 16s rDNA

基金项目:国家863计划项目(2006AA020301)

作者

单位

李树

江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214122

江南大学,生物工程学院,江苏,无锡,214122

陈旭升

江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214122

江南大学,生物工程学院,江苏,无锡,214122

廖莉娟

江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214122

江南大学,生物工程学院,江苏,无锡,214122

张建华

江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214122

江南大学,生物工程学院,江苏,无锡,214122

毛忠贵

江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214122

江南大学,生物工程学院,江苏,无锡,214122

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中文摘要:

改进了ε-聚赖氨酸(ε-PL)产生菌的筛选方法。在加有复合抑制剂的初筛平板上涂布土壤悬液,于30℃培养7 d后,将琼脂整体揭下,平铺到另一加有美兰的琼脂上。挑取形成透明圈的137株菌进行摇瓶发酵,发酵液与Dragendorff试剂和甲基橙反应,有50株呈阳性。通过薄板层析,确定有42株菌的产物含有赖氨酸聚合物。通过水杨醛保护氨基的化学法对产物进行了酰胺键连接方式的研究,确定了聚赖氨酸是由ε-NH2和α-COOH形成的ε-酰氨键聚合而成。通过生理生化特征和分子生物学鉴定,表明其中的一株菌为链霉菌属中的稠李链霉菌Streptomyces pade-nus,其初始菌的摇瓶产量可达0.8 g/L。

英文摘要:

A novel ε-polylysine produce strain screen protocol was developed in this study based on the chemical characteristics of ε-polylysine.Through this three-steps protocol,42 strains has been identified as lysine polymer producer,then those polymer structure were analysized by chemical method,by which confirms that the polymer is linked by ε-NH2 and α-COOH.Among of them,one strain,0.8 g/L ε-polylysine was found in fermentation broth,was identified as Streptomyces padanus by the combination results of physiological and biochemical characteristics,and 16s rDNA sequence.

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