转录因子FOSBmRNA 5′非翻译区内部核糖体进入位点的活性
Activity of Internal Ribosme Entry Site in mRNA 5′ Untranslation Region of Transcription FactorFOSB
DOI:10.3969/j.issn.1673-1689.2019.07.006
中文关键词: 小鼠骨肉瘤病毒致癌基因同族体B 内部核糖体进入位点 5′非翻译区 荧光素酶
英文关键词: FBJ murine osteosarcoma viral oncogene homolog B(FOSB),internal ribosome entry site(IRES),5'untranslated region(5'UTR),luciferase
基金项目:
作者
单位
马晶
江南大学 药学院,江苏 无锡 214122
孙柳柳
马文囡
陶义芬
陈蕴
朱瑞宇
金坚
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中文摘要:
研究FOSB基因侧翼序列是否含有内部核糖体进入位点(internal ribosme entry site,IRES),进而探究其生理功能。作者利用双顺反子报告载体(pRL-FL),构建检测质粒(pRL-FOSB-FL),并将其转染到人胚肾细胞HEK293和4种癌细胞中,检测FOSBmRNA 5′非翻译区(5′untranslated region,5′UTR)IRES活性并通过逐步截断探索其活性中心,最后对肝癌细胞Bel-7402进行药物(紫杉醇和顺铂)刺激。报告载体的结果显示,FOSBmRNA 5′UTR具有IRES活性,且在不同细胞中FOSB IRES活性存在显著性差异,在卵巢癌细胞A2780/WT细胞中FOSBIRES活性较高。序列截断发现,FOSBmRNA 5′UTR中的160nt(-376到-217)对其IRES的功能至关重要.在肝癌细胞中,随着加药浓度的增加,其IRES活性逐渐增加,尤其在紫杉醇刺激下活性增加更为明显。本研究发现的FOSB基因的这些特性为研究FOSB在肿瘤的预防与治疗提供了一种新的思路。
英文摘要:
To explore the possible sequence and function of internal ribosme entry site(IRES) in flanking sequence ofFOSB. Using the typical bicistronic reporter system of dual-luciferase,constructing the reporter plasmids containing the 5'UTR of FOSB mRNA and then transfecting them into HEK293 cell and 4 strains of cancer cells. Performing the deletion ofFOSBmRNA 5'UTR and stimulating the Bel-7402 cell with anticancer drug,paclitaxel or cis-platinum. The results showed that the FOSB mRNA 5'UTR has IRES activity and the sequences of 160nt between -376 and -217 nt are essential to its IRES function. TheFOSB IRES activity can be stimulated in Bel-7402 treated with paclitaxel or cis-platinum,especially under the stimulating of paclitaxel. All these findings provide a new thought and direction for the study ofFOSBin cancer prevention and treatment.
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