Clostridium paraputrificum M-21β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的表达、纯化与性质

Expression, Purification and Characterization of β-N-Acetylglucosaminidase of Hydrogen-Producing Clostridium paraputrificum M21

DOI：

中文关键词: β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶,类腐败梭菌,大肠杆菌,纯化,稳定性

英文关键词:

基金项目:日本文部科学省大学共同利用基金项目(12794004)资助课题.

李华钟 王树英 森本兼司 大宫邦雄

江南大学工业生物技术教育部重点实验室，江南大学分析测试中心，三重大学生物资源学部，三重大学生物资源学部 江苏无锡214036，江苏无锡214036，日本三重县津市514 8507，日本三重县津市514 8507

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中文摘要:

以ClostridiumparaputrificumM21染色体DNA为模板,经PCR扩增获得编码β N 乙酰氨基葡萄糖苷酶的基因nag3A,与质粒pQE30T所构建的表达质粒pNAG3A在EscherichiacoliM15中表达良好.从重组E.coliM15中纯化得到的Nag3A以4 MU GlcNAc为底物时,最适作用温度和最适作用pH分别为50℃和7.0;在30℃以下和pH6～9之间该酶活性稳定.对4 MU GlcNAc的Km和Vmax分别为7.9μmol和21.8μmol/(min·mg).Nag3A可以水解几丁寡糖和几丁质,作用方式是从非还原端逐一水解β 1,4 D N 乙酰氨基葡萄糖苷键,产生N 乙酰氨基葡萄糖,对几丁二糖具有较高的水解活性.

英文摘要:

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