李镭(江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214122;中国农业科学院,饲料研究所,北京,100081)
;丁宏标(中国农业科学院,饲料研究所,北京,100081)
;余晓斌(江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214122)
;乔宇(中国农业科学院,饲料研究所,北京,100081)
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耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)在环境胁迫下具有合成海藻糖的能力[1-2].实验采用PCR的方法,克隆了来源于耻垢分枝杆菌的一段核苷酸序列,与已报道的海藻糖合成酶有60%以上同源性,推测该基因的编码产物具有海藻糖合成酶的活性,为进行其功能验证而在大肠杆菌中进行了表达.目的蛋白以可溶性蛋白为主,约占细胞可溶性总蛋白48%.为目前相关报道的最高值.经活性测定,表达的重组酶无需复性,能够催化麦芽糖生成海藻糖,在20℃反应20 h对麦芽糖的转化率可达61%,具有较高的应用价值.
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