中压液相色谱快速分离纯化Kluyveromyces fragilis β-D-半乳糖苷酶

Purification of Kluyveromyces fragilis β-Galactosidase by Medium-Pressure Liquid Chromotography

DOI：

中文关键词: 中压液相色谱 脆壁克鲁维酵母 β-D-半乳糖苷酶 分离纯化

英文关键词:

基金项目:

刘建福 李素芬 陈占洲 陈庆森 王璋

[1]天津商学院天津食品生物技术重点实验室,天津300134 [2]河北工程大学农学院,河北邯郸056001 [3]江南大学食品学院,江苏无锡214036

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中文摘要:

应用AKTA explorer 100型中压液相色谱快速纯化工艺，系统分离纯化了脆壁克鲁维酵母（Kluyveromyces fragilis）β-D-半乳糖苷酶。K．fragilis发酵生产的菌体细胞经过破碎、离心后的上清液中含有K．fragilis β-D-半乳糖苷酶。粗酶经过AKTA explorer 100中压液相色谱的Hiprep^R 16／10 Source 30Q强阴离子交换柱和Hioad26／60 Superdex凝胶过滤色谱连续两步纯化，酶的回收率为27％，纯化倍数为42。纯化的K．fragilis β-D-半乳糖苷酶在垂直板十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）上，呈现一条染色谱带，表明纯化的酶具有较高的纯度。K．fragilis LFS-8611 β-D-半乳糖苷酶相对分子质量约为60 000。

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