短芽孢杆菌耐碱性木聚糖酶（xylB）的分子生物学研究

Study on Xylanase(xylB) Gene from Bacillus brevi

DOI：

中文关键词: 木聚糖酶 克隆 表达 大肠杆菌 短芽孢杆菌

英文关键词:

基金项目:浙江省重大科技专项项目?

胡春霞 陆平 李卫芬 许梓荣

胡春霞,HU Chun-xia(浙江大学,教育部动物分子营养重点实验室,浙江,杭州,310029;绍兴文理学院,元培学院生命科学系,浙江,绍兴,312000)

;陆平,李卫芬,许梓荣,LU Ping,LI Wei-fen,XU Zi-rong(浙江大学,教育部动物分子营养重点实验室,浙江,杭州,310029)

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中文摘要:

根据已发表的环状芽孢杆菌(Bacillus circulan)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)木聚糖酶基因序列设计引物,首次扩增出短芽孢杆菌(Bacillus brevis)中的β-1,4-内切木聚糖酶(以下简称木聚糖酶,E.C.3.2.1.8)基因片段.序列分析表明,该基因与已登录的木聚糖酶基因AF490979.1和AF490980.1分别有97%和96%的同源性,与其它芽孢杆菌属的同源性也较高.将此基因片段插入表达载体pET-30a(+)构建重组质粒,转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3).重组基因工程菌破碎后进行SDS-PAGE电泳检测,结果表明,IPTG诱导后,木聚糖酶基因在大肠杆菌的胞内获得高效表达,且酶活力最高可达26.14 U/mL.重组木聚糖酶最适温度为50℃,最适pH为9.0.

英文摘要:

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