| Clostridium cellulolyticum D-塔格糖3-差向异构酶基因的克隆、表达及酶活性
| Cloning,Expression and Characterization of Clostridium cellulolyticum D-Tagatose 3-Epimerase
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| DOI：
| 中文关键词: D-塔格糖3-差向异构酶 D-阿洛酮糖 克隆 表达 亲和层析
| 英文关键词: D-tagatose 3-epimerase D-psicose cloning expression affinity chromatography
| 基金项目:中央高校基本科研业务费专项资金项目(JUSRP31002);江苏省社会发展科技支撑项目(BE2010626)
| 作者
| 单位
| 储菲菲
| 食品科学与技术国家重点实验室,江南大学,江苏,无锡,214122
| 邢庆超
| 食品科学与技术国家重点实验室,江南大学,江苏,无锡,214122
| 沐万孟
| 食品科学与技术国家重点实验室,江南大学,江苏,无锡,214122
| 张涛
| 食品科学与技术国家重点实验室,江南大学,江苏,无锡,214122
| 缪铭
| 食品科学与技术国家重点实验室,江南大学,江苏,无锡,214122
| 江波
| 食品科学与技术国家重点实验室,江南大学,江苏,无锡,214122
| 周榴明
| 罗盖特美国公司,美国基奥卡克,52632
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| 中文摘要:
| D-塔格糖3-差向异构酶是生物法生产新型功能性因子D-阿洛酮糖最为有效的酶。作者克隆到一种新型的D-塔格糖3-差向异构酶基因,来源于微生物Clostridium cellulolyticumH10。以pET-22b(+)为载体质粒,E.coliBL21(DE3)为宿主细胞,构建了基因重组菌,IPTG可诱导目的蛋白质的过量表达;经亲和层析纯化的重组蛋白质样品进行SDS-PAGE分析,在约31 000处出现显著的特征蛋白质条带;活性检测结果表明:该重组酶具有较高的转化活性。
| 英文摘要:
| D-tagatose 3-epimerase(DTE) is the most effective enzyme for the biological production of D-psicose,a novel functional factor.In this study,a novel gene encoding DTE from Clostridium cellulolyticum H10 was cloned.pET-22b(+) was for the plasmid,E.coli BL21(DE3) acted as host cells,then the recombinant strains were constructed.The target protein was over-expressed by IPTG induction;the recombinant DTE purified to electrophoretical homogeneity with affinity chromatography was analyzed by SDS-PAGE,showing approximately 31 000 characteristic protein.The result of activity detection revealed that the recombined enzyme had a higher transforming activity.
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