强化前体(UDP-GalNAc)合成路径提高果糖软骨素的生产

Improving Fructosylated Chondroitin Production by Enhancement of UDP-GalNAc Synthetic Pathway

DOI:10.3969/j.issn.1673-1689.2020.03.010

中文关键词: 大肠杆菌K4 代谢路径 果糖软骨素 代谢工程 发酵工程

英文关键词: Escherichia coliK4,metabolic pathway,fructosylated chondroitin,metabolic engineering,fermentation engineeringorganic acid

基金项目:

作者

单位

张权

食品科学与技术国家重点实验室江南大学江苏 无锡 214122

江南大学 工业生物技术教育部重点实验室江苏 无锡 214122

江南大学 食品微生物制造工程实验室江苏 无锡 214122

酉相成

食品科学与技术国家重点实验室江南大学江苏 无锡 214122

江南大学 工业生物技术教育部重点实验室江苏 无锡 214122

江南大学 食品微生物制造工程实验室江苏 无锡 214122

陈修来

食品科学与技术国家重点实验室江南大学江苏 无锡 214122

江南大学 工业生物技术教育部重点实验室江苏 无锡 214122

江南大学 食品微生物制造工程实验室江苏 无锡 214122

刘佳

食品科学与技术国家重点实验室江南大学江苏 无锡 214122

江南大学 工业生物技术教育部重点实验室江苏 无锡 214122

江南大学 食品微生物制造工程实验室江苏 无锡 214122

罗秋玲

食品科学与技术国家重点实验室江南大学江苏 无锡 214122

江南大学 工业生物技术教育部重点实验室江苏 无锡 214122

江南大学 食品微生物制造工程实验室江苏 无锡 214122

刘立明

食品科学与技术国家重点实验室江南大学江苏 无锡 214122

江南大学 工业生物技术教育部重点实验室江苏 无锡 214122

江南大学 食品微生物制造工程实验室江苏 无锡 214122

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中文摘要:

硫酸软骨素是一种重要的糖胺聚糖,广泛应用于医药、食品、保健品行业。为了提高硫酸软骨素类似物果糖软骨素的生产,通过过量表达磷酸葡糖胺变位酶(GlmM)、葡萄糖胺合酶(GlmS),优化融合蛋白glmM-glmS的表达水平,获得了最优工程菌株E. coliK4-H-glmM-glmS,并确定了最适IPTG浓度(0.4 mmol/L)以及诱导温度(37 ℃)。最后,在5-L罐水平下,借助DO-stat补料模式,果糖软骨素的产量达到了3.99 g/L,较原始菌株提高了108.9%,为工业化生产果糖软骨素奠定了基础。

英文摘要:

Sulfated chondroitin is an important glycosaminoglycans,which is widely used in medical,food and cosmetic fields. To improve the production of fructosylated chondroitin,GlcN synthase(GlmM) and GlcN-6-P synthase(GlmS) were overexpressed,the confusion protein was constructed and a recombinant strainE. coliK4-H-glmM-glmS was obtained. Then,the optimal induction conditions including IPTG concentration and induction temperature were estalished. Finally,with the DO-stat feeding strategy in a 5 L fermenter,the yield was up to 3.99 g/L,which was 108.90% higher than that with wild type strain. The study provides a basis for industrial-scale production of fructosylated chondroitin.

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